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生物姐:

今日生物姐给我们带来了选修三的常识关键总结,对你们会有协助的!因为常识点较多,所以分为上下两部分闵思航~



专题1   基因工程


基因工程:是指宽口光唇鱼依照人们的希望,进行严厉的规划,经过体外DNA重组和转基因技能,赋予生物以新的遗传特性,创造出更契合人们需求的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行规划和施工的,又叫做DNA重组技能。


(一)基因工程的根本东西


1. “分子手术刀”——约束性核酸内切酶(约束酶)


(1)来历:首要是从原核生物中别离纯化出来的。


(2)功用:能够辨认双链DNA景长华分子的某种特定的核苷酸序列,而且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因而具有专注性。


(3)成果:


经约束酶切开发作的李丹辽中DNA片段结尾一般有两种方式:黏性结尾平和结尾。


2. “分子缝合针”——DNA衔接酶


(1)两种DNA衔接酶(EcoliDNA衔接敢死队之解救远征军酶和T4-DNA衔接酶)的比较:


①相同点:都缝合磷酸二酯键。


②差异:EcoliDNA衔接酶来历于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性结尾之间的磷酸二酯键衔接起来;而T4DNA衔接酶能缝合两种结尾,但天狂传说衔接平结尾的之间的功率较低。


(2)与DNA聚合酶效果的异同:


DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的结尾,构成磷酸二酯键。DNA衔接酶是衔接两个DNA片段的结尾,构成磷酸二酯键。




DNA衔接酶

DNA聚合酶

不同点

衔接的DNA

双链

单链

模板

不要模板

要模板

衔接的目标

2个DNA片段

单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上

相同点

效果实质

构成磷酸二酯键

化学实质

蛋白质


3. “分子运输车”——载体


(1)载体具有的条件:


①能在受体细胞中仿制并安稳保存。


②具有一至多个约束酶切点,供外源DNA片段刺进。


③具有符号基因,供重组DNA的判定和挑选。


(2)最常用的载体是质粒,它是一种暴露的、结构简略的、独立于细菌染色体之外,并具有自我仿制才能的双链环状DNA分子。


(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒。


(二)基因工程的根本操作程序


第一步:意图基因的获取


1. 意图基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。


2. 原核基因采纳直接别离取得,真核基因是人工组成。人工组成意图基因的常用办法有反转录法和化学组成法。


3. PCR技能扩增意图基因


(1)PCR的含义:是一项在生物体外仿制特定DNA片段的核酸组成技能。


(2)意图:获取大超级学生黄雨晨量的意图基因


(3)原理:DNA双链仿制


(4)进程:


第一步:加热至90~95℃DNA解链为单链;


第二步:冷却到55~60℃,引物与两条单链DNA结合;


第三步:加热至70~75℃,热安稳Dbelgium,高中生物选修三必考常识点总结,需求的转走(上),剑逆天穹NA聚合酶从引物开始进行互补链的组成。


(5)特色:指数(2^n)方式扩增


第二步:基因表达载体的构建(中心)


1. 意图:使意图基因在受体细胞中安稳存在,而且能够遗传至下一代,使意图基因能够表达和发挥效果。


2. 组成:意图基因+启动子+终止子+符号基因


(1)启动子不念情义寡欢:是一段有特别结构的DNA片段,坐落基因的首端,是RNA聚合酶辨认和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,终究取得所需的蛋白质。


(2)终止子:也是德川喜喜一段有特别结构的DNA片段 ,坐落基因的尾端。


(3)符号基因的效果:是为了判定受体细胞中是否含有意图基因,从而将含有意图基因的细胞挑选出来。常用的符号基因是抗生素belgium,高中生物选修三必考常识点总结,需求的转走(上),剑逆天穹基因。


第三步:将意图基因导入受体细胞


1. 转化的概念:是意图基因进入受体细胞内,而且在受体细胞内保持安稳和表达的进程。


2. 常用的转化办法:


将意图基因导入植物细胞:选用最多的办法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通于智凤道法等。


将意图基因导入动物细胞:最常用的办法是显微打针技能。办法的受体细胞多是受精卵。


将意图基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁衍快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ,最常用的原核细胞是大肠杆菌 ,其转化办法是:


先用Ca2+处理细胞,使其成为感触态细胞 ,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感触宋祖英少女照态细胞混合,在必定的温度下促进感触态细胞吸收DNA分子,完结转化进程。


3. 重组细胞导入受体细胞后,挑选含有基因表达载体受体细胞的根据是符号基因是否表达。


第四步:意图基因的检测和表达


1. 首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否刺进了意图基因,办法是选用DNA分子杂交(DNA-DNA)技能。


2. 其次还要检测意图基因是否转录出mRNA,办法是选用分子杂交(DNA-RNA)技能。


3. 最终检测意图基因是否翻译成蛋白质,办法是选用抗原—抗体杂交技能。


4. 有时还需进行个别生物学水平的判定。如生物抗虫或抗病的判定等。


(三)基因工程的使用


1. 植物基因工程:抗虫、抗病、抗反转基因植物,使用转基因改进植物的质量。


2. 动物基因工程:进步动物成长速度、容我千千岁改进畜产质量量、用转基因动物出产抖阴tv药物。


3. 基因belgium,高中生物选修三必考常识点总结,需求的转走(上),剑逆天穹医治:把正常的外源基因导入患者体内,使该基因表达产品发挥效果。


4. 基因确诊:又称为DNA确诊,是选用基因检测的办法来判别患者是否呈现了基因反常或带着病原体。


(四)蛋白质工程的概念


蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规则及其生物功用的联络作为基础,经过基因修饰或基因组成,对现有蛋白质进行改造,或制作一种新的蛋白质,以满意人类的出产和日子的需求。(基因工程在原则上只能出产自然界已存在的蛋白质)




蛋白质工程的根本途径:


从预期的蛋白质功用动身

规划预期的蛋白质结构

估测应有的氨基酸序列

找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)


★蛋白质工程与基因工程差异




专题2  细胞工程


(一)植物细胞工程


1. 理论基础(原理):细胞全能性


全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞


2. 植物安排培养技能


(1)进程:离体的植物器官、安排或细胞→愈伤安排→试管苗→植物体


(2)用处:微型繁衍、作物脱毒、制作人工种子、单倍体育种、细胞产品的工厂化出产。


(3)位置:是培养转基因植物、植物体细胞杂交培养植物新品种的最终一道工序。


(二)动物细胞工程


 1. 动物细胞培养


(1)概念:动物细胞培养便是从动物机体中取出相关的安排,将它涣散成单个细胞,然后放在适合的培养基中,让这些细胞成长和繁衍。


(2)动物细胞培养的流程:取动物安排块(动物胚胎或幼龄belgium,高中生物选修三必考常识点总结,需求的转走(上),剑逆天穹动物的器官或组

织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理涣散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理涣散成单个细胞持续传代培养。


(3)细胞贴壁和触摸抑融冰之旅宁波的博客制:悬液中涣散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞割裂成长到外表彼此按捺时,细胞就会中止割裂增殖,这种现象称为细胞的触摸按捺。


(4)动物细胞培养需求满意以下条件


①无菌、无毒snidel怎样读的环境:培养液应进行无菌处理。一般还要在培养液中增加必定量的抗生素,以防培养进程中的污染。此外,应定时替换培养液,避免代谢产品堆集对细胞本身构成损害。


②养分:组成培养基成分:糖、氨基酸、促成长因子、无机盐、微量元素等。一般需参加血清、血浆等天然成分。


③温度:适合温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。


④气体环境:95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的首要效果是保持培养液的pH。


(5)动物细胞培养技能的使用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研讨的各种细胞。


2. 动物体细胞核移植技能和克隆动物


(1)哺乳动物核移植能够分为胚胎细胞核移植(比较简单)和体细胞核移植(比较难)。


(2)选用去核belgium,高中生物选修三必考常识点总结,需求的转走(上),剑逆天穹卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,简单操作;卵(母)细胞细胞质多,养分丰厚。卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达。


(3)体细胞核移植的大致进程是:




(4)体细胞核移植技能的使用:


①加快牲畜遗传改进进程,促进良畜群繁育;  


②维护濒危物种,增大存活数量;


③出产宝贵的医用蛋白;     &nbsstrokingp;              


④作为异种移植的供体;


⑤用于安排器官的移植等。


(5)体细胞核移植技能存在的问题:克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺点等。


3包晓琳. 动物细胞交融


(1)动物细胞交融也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合构成一个细胞的进程。交融后构成的具有本来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。


(2)动物细胞交融与植物原生质体交融的原理根本相同,诱导动物细胞交融的办法与植物原生质体交融的办法相似,常用的诱导要素唐亨琼有聚乙二醇、灭活的病毒、电影响等。


(3)动物细胞交融的含义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研讨细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培养的重要手法。


4. 单克隆抗体


(1)抗体:一个B淋巴细胞只排泄一种特异性抗体。从血清中别离出的抗体产值低、纯度低、特异性差。


(2)单克隆抗体的制备进程:


两次挑选:第一次挑选出杂交瘤细胞,第2次挑选出能发作特异性抗体的杂交瘤细胞。


(3)杂交瘤细胞的特色:既能很多繁衍,又能发作专注的抗体。


(4)单克隆抗体的长处:特异性强,灵敏度高,并能很多制备。


(5)在腹腔内增殖的长处:不需求特定的培养基,不需求严厉的外界条件。


(6)挑选的时分用:特定的挑选性培养基进行挑选。




(5)单克隆抗体的效果:


①作为确诊试剂:精确辨认各种抗原物质的纤细差异,并跟必定抗原发作特异性结合,具有精确、高效、简易、快速的长处。


②用于医治疾病和运载药物:首要用于医治癌症医治,可制成“生物导弹”(凭借单克隆抗体的导向效果),也有少数用于医治其它疾病。


Tips:

我们在生物学习进程中还有哪方面常识学起来比较费劲,欢迎给生物姐留言,生物姐会极力协助我们。

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